（一）回答與泡菜製作有關的問題：（1）用蘿蔔等根菜類蔬菜製作泡菜，用熱水短時處理，可抑制某些微生物產生

問題詳情：

（一）回答與泡菜製作有關的問題：

（1）用蘿蔔等根菜類蔬菜製作泡菜，用熱水短時處理，可抑制某些微生物產生_____，從而使成品泡菜口感較脆。同時，該處理也會使泡菜發酵時間縮短，其原因是_______。

（2）泡菜發酵初期，由於泡菜罐加蓋並水封，會使______菌被逐漸抑制。發酵中期，乳*菌大量繁殖，會使______菌受到抑制。發酵後期，乳*生產過多，會使乳*菌受到抑制。

（3）從泡菜汁中可分離製作*奶的乳*菌，首先對經多次發酵的泡菜汁進行過濾，然後取濾液進行______，再用______的方法在某種含牛乳的專用的培養基中進行初步篩選。該培養基必須含有______，以便於觀察是否產*。

（4）自然界中醋桿菌常與乳*菌共同生長。若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養基中應添加______。

（二）回答與基因工程和植物克隆有關的問題：

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質體，先將葉片經表面消毒並去除下表皮，再將其置於經______處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解後，經多次離心獲得原生質體。然後測定該原生質體的活*，可採用的方法有______（答出2點即可）。

（2）若要獲得已知序列的抗病基因，可採用______或PCR的方法。為了提高目的基因和質體重組的成功率，選擇使用______，對含目的基因的DNA片段進行處理，使其兩端形成不同的粘*末端，對質體也進行相同的處理，然後用DNA連接酶連接形成重組質體。通過在大腸桿菌中______，以獲得大量的重組質體，最終將其導入原生質體中。

（3）原生質體在培養過程中，只有重新形成______後，才可進行有絲*。多次*形成的小細胞團可通過______或器官發生的途徑再生植株。

【回答】

果膠酶    細胞破裂，細胞內營養物質外流使乳*菌快速地獲得營養物質    喜好氧的    不耐*的    稀釋    塗布分離    *鹼指示劑    乙醇    過濾滅菌    染*法，滲透吸水或失水    化學合成    兩種限制*核*內切酶    擴增    細胞壁    胚胎發生   

【解析】

【分析】

泡菜製作：

①菌種：假絲酵母和乳*菌；②發酵原理：在無氧條件下，微生物利用菜中的糖和其他營養物質進行發酵，發酵產物有有機*和醇類物質等，還有亞**。③亞**鹽的測定：亞**鹽可與對氨基苯磺*發生重氮化反應，這一產物再與N-1-萘基乙二*偶聯，形成紫紅*產物，可用光電比*法定量。

【詳解】

（一）

（1）用蘿蔔等根菜類蔬菜製作泡菜時，為抑制某些微生物產生果膠酶，從而使成品泡菜口感較脆，可用熱水短時處理。同時，該處理也會使細胞破裂，細胞內營養物質外流使乳*菌快速地獲得營養物質，從而使泡菜發酵時間縮短。

（2）泡菜發酵初期，由於泡菜罐加蓋並水封，形成無氧環境，會使喜好氧的菌被逐漸抑制。發酵中期，乳*菌大量繁殖，產生乳*，會使不耐*的菌受到抑制。發酵後期，乳*生產過多，又會抑制乳*菌。

（3）從泡菜汁中可分離製作*奶的乳*菌，首先對經多次發酵的泡菜汁進行過濾，然後取濾液進行稀釋，再用塗布分離的方法在某種含牛乳的專用的培養基中進行初步篩選。為了便於觀察是否產*，該培養基必須含有*鹼指示劑。

（4）自然界中醋桿菌常與乳*菌共同生長。由於醋*桿菌可以利用乙醇產生醋*，若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養基中應添加乙醇。

（二）

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質體，先將葉片經表面消毒並去除下表皮，再將其置於經過濾滅菌處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解後，經多次離心獲得原生質體。可採用染*法、滲透吸水或失水的方法測定該原生質體的活*。

（2）可採用人工合成或PCR的方法獲得已知序列的抗病基因。對含目的基因的DNA片段進行處理，為使其兩端形成不同的粘*末端，需要選擇使用兩種限制*核*內切酶，對質體也進行相同的處理，為了提高目的基因和質體重組的成功率，然後用DNA連接酶連接形成重組質體。通過在大腸桿菌中擴增，以獲得大量的重組質體，最終將其導入原生質體中。

（3）原生質體在培養過程中，只有重新形成細胞壁後，才可進行有絲*。多次*形成的小細胞團可通過胚胎發生或器官發生的途徑再生植株。

【點睛】

本題考查選修教材中的相關知識，在學習本部分內容時，要求考生對所學知識進行對比、歸納，然後建立知識間的聯繫，做到夯實基礎，學會融會貫通。

知識點：生物技術在食品加工及其他方面的應用

題型：綜合題