菌落總數可作為判定食品被污染程度的標誌，也可以用於觀察細菌在食品中繁殖的動態，以便對送檢樣品進行衞生學評估提供...

問題詳情：

菌落總數可作為判定食品被污染程度的標誌，也可以用於觀察細菌在食品中繁殖的動態，以便對送檢樣品進行衞生學評估提供*據。下圖是某樣品培養簡化流程圖，請分析回答下列問題：

（1） 該營養瓊脂培養基配製過程中，其基本步驟包括按照培養基*準確計算、稱量、溶化、調節pH、____法滅菌等。然後將培養基放入47 ℃水浴鍋保温，選擇此温度的理由是____。

（2） 實驗過程中須將樣品剪碎並使用均質器10 000 r·min-1處理1 min，其目的是________。從水浴鍋取出營養瓊脂培養基倒平板適量，稍冷卻後移液1 mL於培養皿進行塗布，塗布時可____，使塗布更均勻。

（3） 本實驗用菌落計數的原理是基於____，運用這種方法統計的結果往往較實際值偏____。具體培養結果如下表。選取菌落數30～300的培養皿作為菌落總數的測定標準。當只有一個稀釋梯度的平均菌落數符合此範圍，以該培養皿菌落數×稀釋倍數報告。當有兩個梯度菌落值在30～300之間，報告結果由二者菌落數比值決定，若比值不大於2，則取平均數，且菌落數大於100取兩位有效數字，兩位之後的數值四捨五入；若比值大於2，則報告稀釋度較低（稀釋次數越多，稀釋度越高）的培養皿菌落數。請填寫例次2、3中“?”處的菌落總數分別為____、____。

【回答】

高壓蒸汽    保*培養基處於溶化狀態（在凝固之前接種且不致將培養物燙死）    儘量使樣品中的微生物細胞分散    轉動培養皿    一個菌落代表一個活菌    小    38000    27100   

【分析】

各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及温度的要求。根據培養基中是否含有瓊脂，即瓊脂的多少可以將培養基分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。製備固體培養基的方法：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

【詳解】

（1）配製培養基時應按照培養基*準確稱量各組分，將其溶解、定容後，調節培養基的pH，並進行高壓蒸汽滅菌；然後將培養基放入47 ℃水浴鍋保温，用手觸摸不燙手還便於*作，並能保*培養基處於溶化狀態，且在凝固之前接種不致將培養物燙死。

（2） 實驗過程中要將樣品剪碎並使用均質器10 000 r·min-1處理1 min，儘量使樣品中的微生物細胞分散；為了使塗布更均勻，塗布時可轉動培養皿。

（3） 當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源於樣品稀釋液中的一個活菌，因此一個菌落可代表一個活菌。但在培養過程中，可能不是一個活菌形成一個菌落，因此運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小。結合題幹可知，報告菌落總數時，應選取菌落數30～300的培養皿作為菌落總數的測定標準。當有兩個梯度菌落值在30～300之間時，報告結果由二者菌落數比值決定，若比值不大於2，則取平均數，且菌落數大於100取兩位有效數字，兩位之後的數值四捨五入；若比值大於2，則報告稀釋度較低的培養皿菌落數。因此例次2應選擇10-2和10-3的菌落數，且295記為30，該培養皿菌落數為（30+46）÷2=38，故例次2的菌落總數為該培養皿菌落數×稀釋倍數，既38×1000=38000，例次3應選取10-2的菌落數報告，則3菌落總數為271×100=27100。

【點睛】

本題旨在考查微生物的分離和培養、某種微生物數量的測定，意在考查具備驗*簡單生物學事實的能力，並能對實驗現象和結果進行處理和報告，具有對一些生物學問題進行初步探究的能力。

知識點：微生物的培養與應用

題型：綜合題