融合PCR技術是採用具有互補末端的引物,將不同來源的擴增片段連接起來的方法,其過程如下圖1所示。下圖2是中間載...
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問題詳情:
融合PCR技術是採用具有互補末端的引物,將不同來源的擴增片段連接起來的方法,其過程如下圖1所示。下圖2是中間載體1和中間載體2(利用融合PCR技術構建成)構建成葉綠體定點整合表達載體示意圖(限制酶酶切位點標註於載體外側),葉綠體定點整合表達載體通過與葉綠體基因的同源重組,將目的基因整合於葉綠體DNA上的特定位點上。請據圖回答下列問題。
(1)圖1第一階段中PCR至少進行____________次循環,才能獲得雙鏈等長的DNA,第二階段中引物2與引物3部分鹼基的____________關係使得兩DNA能成功“搭橋”連接起來。
(2)若通過融合PCR技術將啟動子、標記基因、目的基因、終止子拼接起來,需要設計__________種引物,其中能夠起着“搭橋”作用的引物有__________種。
(3)圖2中需使用_________________(填限制酶)和DNA連接酶將兩中間載體構建成定點整合表達載體,途中定點整合表達載體上未標出的結構是__________。
(4)葉綠體定點整合表達載體中_____________________________________________(填基因)能使目的基因準確*入葉綠體DNA上的特定位點上。與利用農桿菌轉化法相比,利用定點整合表達載體將目的基因導入葉綠體中的優點是____________________________________。
【回答】
(1)2 互補配對
(2)8 6
(3)Spe I、Sal I 複製原點
(4)葉綠體同源重組基因1和葉綠體同源重組基因2
能實現定點整合到葉綠體中,且不易隨花粉擴散帶來安全問題
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題