研究表明,HER2/neu是一種原癌基因,它表達的H蛋白是一種跨膜蛋白,在多種惡*腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表...
問題詳情:
研究表明,HER2/neu是一種原癌基因,它表達的H蛋白是一種跨膜蛋白,在多種惡*腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達.抗H蛋白單株抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長,目前已成為有效的生物治療手段.圖1表示H蛋白的結構,胞外區具有抗原特異*,圖2示抗H蛋白單株抗體的製作過程,圖中的“+”表示含有、“﹣”表示沒有,Ig表示抗體.
(1)選擇H蛋白作為單株抗體的作用靶點,是因為H蛋白在成年個體的正常組織中 (填“低表達”或“高表達”).製備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時,最簡便的做法是根據H蛋白 區結構特點構建目的基因,轉入原核細胞表達並提純.
(2)將H蛋白注*到小鼠體內,從該小鼠的脾臟中分離 細胞與骨髓瘤細胞進行融合,使用的化學誘導劑是 .
(3)將融合細胞在選擇培養基中培養,一段時間後培養基中只有雜交瘤細胞生長.將雜交瘤細胞轉到多孔培養板上培養,應用 技術進行抗體陽*檢測,從而篩選出 細胞.
(4)在將篩選得到的雜交瘤細胞通過體外培養獲取單株抗體的過程中,為避免有害代謝產物的積累,常採取的措施是 .
(5)治療乳腺癌時,可單獨使用抗H蛋白單株抗體,也可將該單株抗體與抗癌*物結合構建“生物導*”,殺死癌細胞.這充分體現了單株抗體 的特點.
【回答】
解:(1)根據題意可知,H蛋白在多種惡*腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達,因此原癌基因的表達產物H蛋白在正常組織中低表達;由於抗體主要存在於細胞外液中,因此根據H蛋白的結構圖可知,若用H蛋白製備抗原需要利用胞外區基因,由製備獲得的抗體作用於該抗原的胞外區.
(2)將H蛋白注*到小鼠體內,從該小鼠的脾臟中分離 漿細胞(免疫後的B細胞、B細胞)細胞與骨髓瘤細胞進行融合,使用的化學誘導劑是 PEG(聚乙二醇).
(3)將融合細胞在選擇培養基中培養,一段時間後培養基中只有雜交瘤細胞生長.將雜交瘤細胞轉到多孔培養板上培養,應用 抗原﹣抗體雜交技術進行抗體陽*檢測,從而篩選出 能產生抗H蛋白抗體的雜交瘤細胞.
(4)在將篩選得到的雜交瘤細胞通過體外培養獲取單株抗體的過程中,為避免有害代謝產物的積累,常採取的措施是 定期更換培養液.
(5)單株抗體的優點是特異*強,靈敏度高、化學*質單一等特點.
故*為:
(1)低表達 胞外
(2)漿細胞(免疫後的B細胞、B細胞) PEG(聚乙二醇)
(3)抗原﹣抗體雜交 能產生抗H蛋白抗體的雜交瘤細胞
(4)定期更換培養液
(5)特異*強(識別抗原部位專一)
知識點:克隆技術
題型:填空題