如圖為綠*熒光小鼠製備流程圖，Gfp是綠*熒光蛋白基因，請分析回答：（1）構建表達載體需要的酶是：　     ...

問題詳情：

如圖為綠*熒光小鼠製備流程圖，Gfp是綠*熒光蛋白基因，請分析回答：

（1）構建表達載體需要的酶是：　                  　，表達載體包含綠*熒光蛋白基因Gfp、　         　、　        　、終止子和複製原點等．

（2）圖中載體上的NEO基因是一種抗生素抗*基因，圖中步驟③所用的G418是一種抗生素（對細胞有毒害作用），添加G418的目的是　              　．

（3）圖中所用的胚胎幹細胞來自於　                    　．

（4）圖中步驟⑤要將細胞注*入圖中囊胚的　      位置，圖中步驟⑥胚胎移植前要對*母鼠用激素處理，目的是　                　．

（5）可以使用　               　方法在蛋白質水平上鑑定小鼠是否存在綠*熒光蛋白．

【回答】

解：（1）構建表達載體時，先需要用限制酶切割含有目的基因的DNA分子和運載體，還需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組質體；表達載體包含目的基因（綠*熒光蛋白基因Gfp）、標記基因、啟動子、終止子和複製原點等．

（2）步驟③所用的G418是一種抗生素，其作用是篩選出導入目的基因的胚胎幹細胞．

（3）胚胎幹細胞來自於早期胚胎或原始*腺．

（4）囊胚包括滋養層細胞和內細胞團細胞，其中滋養層細胞將發育成胎盤和胎膜，而內細胞團細胞將發育成各種組織，因此圖中步驟⑤要將細胞注*入圖中囊胚的內細胞團位置；圖中步驟⑥胚胎移植前要對*母鼠用激素處理，目的是同期發情處理．

（5）從分子水平上檢測小鼠是否存在綠*熒光蛋白，可採用抗原﹣抗體雜交法．

故*為：

（1）限制*核*內切酶、DNA連接酶      標記基因      啟動子

（2）篩選出導入目的基因的胚胎幹細胞

（3）早期胚胎或原始*腺

（4）內細胞團       同期發情處理

（5）抗原﹣抗體雜交

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題