將動物致病菌的抗原基因導入馬鈴薯製成植物疫苗，飼餵轉基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力．以下是與植物疫苗製備過程相關...

問題詳情：

將動物致病菌的抗原基因導入馬鈴薯製成植物疫苗，飼餵轉基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力．以下是與植物疫苗製備過程相關的圖和表． 表1 引物對序列表

表2 幾種限制酶識別序列及切割位點表

請根據以圖表回答下列問題． （1）在採用常規PCR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同於一般生物體內的DNA聚合酶，其最主要的特點是         基數量和種類來設定．表1根據模板設計的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結合示意圖．請判斷哪一對引物可採用較高的退火温度            ． （3）目的基因*入質體後，不能影響質體的       ．載體構建過程需要的工具酶為         和           （4）圖1步驟3所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端鹼基序列是否有專一*要求      （5）為將外源基因轉入馬鈴薯，圖1步驟6轉基因所用的細菌B通常為    ． （6）對符合設計要求的重組質體T進行酶切，假設所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據圖1中標示的酶切位點和表2所列的識別序列，對以下酶切結果作出判斷． ①採用EcoRI和PstI酶切，得到     種DNA片斷． ②採用EcoRI和SmaI酶切，得到        種DNA片段．

【回答】

解：（1）PCR方法擴增目的基因的過程中，需要進行高温解鏈過程，因此使用的DNA聚合酶要具有耐高温的特*． （2）耐高温的DNA分子中通常含有G與C鹼基比例大，因為它們之間形成三個*鍵，穩定*強．引物B中含C與G的鹼基對較多，可採用較高的退火温度． （3） （4）多種限制酶切割，形成不同的切割位點，所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端鹼基序列就沒有專一*要求． （4）植物基因工程中，將目的基因導入受體細胞常用農桿菌轉化法，因此常用農桿菌做受體細胞． （5）據圖分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段產生了X、Y兩個片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割質體產生了 M、N兩個片段，且M、N片段間存在Pst I酶切點．因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割這兩片段形成的重組質體，由於保留了Pstl的切割位點，所以可以得到兩種DNA分子，而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重組質體中，只能產生一種DNA片斷． 故*為： （1）耐高温   （2）引物對B   （3）複製 限制酶 連接酶   （4）否     （5）農桿菌     （6）①2  ②1

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題