Anti基因是小型豬器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板鏈與Anti基因的模板鏈互補。科學家利用...

問題詳情：

Anti基因是小型豬器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板鏈與Anti基因的模板鏈互補。科學家利用合成的reAnti基因培育出轉基因複製豬，用於解決人類器官移植時免疫排斥。

(l)利用PCR技術對reAnti基因進行擴增，其原理是 ___，在構建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶切割reAnti基因和運載體DNA來獲得不同的黏*末端，原因是____。

(2)豬胎兒成纖維細胞培養過程中，需要用 ___酶將組織分散成細胞懸液。培育轉基因豬時，應使用 ___技術將含有reAnti基因的表達載體導入豬成纖維細胞。再將該轉基因豬的細胞核注入____時期的卵母細胞中，構建重組胚胎。

(3)胚胎培養液中除了一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加“兩*、兩素”以及動物血清，其中的“兩*”是指____。

(4)用 ___技術檢測出轉基因複製豬的細胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是____。

【回答】

DNA雙鏈複製    防止目的基因和運載體DNA自身環化和反向連接（使目的基因定向連接到運載體上）    胰蛋白酶（膠原蛋白酶）    顯微注*    減數第二次*中期    氨基*和核苷*    DNA分子雜交技術    reAnti基因抑制了Anti基因的翻譯過程，不能合成相應的抗原（reAnti基因轉錄出的mRNA與Anti基因轉錄出的mRNA形成了雙鏈，不能翻譯合成相應的抗原）   

【分析】

本題是技術是要解決用豬的器官代*體器官進行移植時出現的免疫排異反應。利用合成的reAnti基因培育出轉基因複製豬，用於解決人類器官移植時免疫排斥的原理是：由於以reAnti基因模板鏈合成的mRNA能與Anti基因的mRNA互補配對，這樣在它們互補配對後，會導致Anti基因的mRNA不能進行翻譯，因此轉基因複製豬不含有豬抗原。

【詳解】

（l）利用PCR技術對reAnti基因進行擴增，其原理類似於DNA的天然複製過程，DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，通過一個或兩個人工合成的寡核苷*引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合，形成部分雙鏈。在構建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶切割reAnti基因和運載體DNA來獲得不同的黏*末端，是為了防止目的基因和運載體DNA自身環化和反向連接（使目的基因定向連接到運載體上）。

（2）動物組織的細胞之間相連的物質的化學本質是蛋白質，所以用胰蛋白酶或膠原蛋白酶對動物組織進行處理，使其水解成小分子物質，從而使動物組織分散成細胞懸液。

基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌，枯草桿菌，土壤農桿菌，酵母菌和動植物細胞等。其中，對於細菌或植物細胞，常用質體作為載體將目的基因導入感受態細胞內；動物細胞則用顯微注*的方法，將含有reAnti基因的表達載體導入豬成纖維細胞。再將該轉基因豬的細胞核注入減數第二次*中期的卵母細胞中，構建重組胚胎。

（3）胚胎培養液中除了一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加“兩*、兩素”以及動物血清，其中的“兩*”是指氨基*和核苷*，兩素指維生素和激素。

（4）用DNA分子雜交技術技術檢測出轉基因複製豬的細胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是reAnti基因抑制了Anti基因的翻譯過程，不能合成相應的抗原（reAnti基因轉錄出的mRNA與Anti基因轉錄出的mRNA形成了雙鏈，不能翻譯合成相應的抗原）。

【點睛】

本題涉及的現代生物技術有基因工程和胚胎工程，包括目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和表達、動物體細胞核移植技術、早期胚胎培養技術，胚胎移植技術，將科學的最新進展和教材聯繫起來，考查了考生運用課本知識解決實際問題的能力。

知識點：基因工程

題型：填空題